屋塵螨過(guò)敏原

背景簡(jiǎn)介：

支氣管哮喘（bronchial asthma，簡(jiǎn)稱哮喘）是一種以嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞反應(yīng)為主的氣道變應(yīng)性炎癥和氣道反應(yīng)性為特征的疾病。由于哮喘的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病因與發(fā)病機(jī)理尚不明了，臨床實(shí)驗(yàn)受倫理及方法限制，因此需要通過(guò)構(gòu)建哮喘動(dòng)物模型來(lái)研究疾病發(fā)生發(fā)展以及制定相應(yīng)治療措施。塵螨是最常見(jiàn)的空氣過(guò)敏原，全球85%的哮喘患者對(duì)塵螨過(guò)敏。屋塵螨是一種免疫復(fù)合物，能夠激活先天免疫和后天免疫應(yīng)答。研究表明，HDM中的蛋白酶，如胰蛋白酶樣酶，催過(guò)敏有促進(jìn)作用，從而導(dǎo)致過(guò)敏幾天對(duì)塵螨的過(guò)敏反應(yīng)。
利用塵螨誘發(fā)動(dòng)物建立哮喘模型，方法簡(jiǎn)便，操作性強(qiáng)，且成功率高。

美國(guó)Greer 公司專注于過(guò)敏原檢測(cè)，提供各種動(dòng)物、植物及食品、真菌等各種過(guò)敏原提取物。塵螨過(guò)敏原提取物，廣泛應(yīng)用于哮喘模型的制備。

產(chǎn)品信息：

英文名稱：D.pteronyssinus ( House dust mite, HDM)

中文名稱：屋塵螨

貨號(hào)：XPB82D3A2.5  XPB82D3A25  XPB91D3A2.5  XPB91D3A25    XPB81D3A2.5  XPB81D3A25

規(guī)格：2.5ml/25ml

產(chǎn)品應(yīng)用：

1.該產(chǎn)品為凍干粉,一般推薦客戶參照COA中的蛋白濃度做稀釋，客戶收到貨后用去離子水或蒸餾水稀釋至相應(yīng)工作濃度或儲(chǔ)液濃度。比如：2.5ml包裝的，加入2.5ml水，因?yàn)槊總€(gè)批次的蛋白含量有差異，可根據(jù)質(zhì)檢報(bào)告，計(jì)算終濃度。客戶也可依據(jù)自身實(shí)驗(yàn)要求，稀釋到任意濃度。

2.過(guò)敏原稀釋后，如果一次用不完，推薦分裝后-20℃保存（可分裝成使用濃度后保存）。可凍融一次，解凍后，在一周內(nèi)用完。

3.凍干粉過(guò)敏原效期為10年。

4.常見(jiàn)的兩個(gè)比較相似的產(chǎn)品：B82 和B84，B82 和B84，均只代表D.pteronyssinus，不是實(shí)際訂貨貨號(hào)，D.pteronyssinus產(chǎn)品分粗制品和凍干粉，實(shí)貨都是凍干粉。凍干粉是粗品進(jìn)一步純化后的產(chǎn)品。B82和B84在粗品階段，只在純度上有細(xì)微差別,貨號(hào)分別為：RMB82M 和RMB84M。凍干粉的D.pteronyssinus只有XPB82D3A2.5這一個(gè)貨號(hào)（是由粗品RMB82M純化后獲得。）

參數(shù)說(shuō)明：

收到貨后，會(huì)有隨貨的質(zhì)檢報(bào)告（COA）。塵螨過(guò)敏原會(huì)有4個(gè)參數(shù)說(shuō)明，其他類過(guò)敏原，如食物、花粉類等過(guò)敏原只有2個(gè)參數(shù)（干重和蛋白含量）說(shuō)明。

以XPB82D3A2.5(Lot#385930)為例，參數(shù)說(shuō)明：

1）純過(guò)敏原（Der P1）： 是指純過(guò)敏原Der P1 的含量（當(dāng)然這個(gè)提取物的組分不只是只有Der P1,也有其他形式的，這個(gè)是主要的過(guò)敏原成分）。154.17mcg/vial 表示 Der P1 的含量是：154.17ug/瓶，mcg, microgram 微克的縮寫(xiě)。

2）干重（Dry Weight）: 干重16.7mg,  是去除水分后，瓶子里粉末的含量。

3）總蛋白（Protein） ：蛋白含量4.43mg， 是指：過(guò)敏原提取物的總蛋白含量。

4）內(nèi)毒素含量（Endotoxin）：內(nèi)毒素水平。塵螨有一款低內(nèi)毒含量（做過(guò)內(nèi)毒素處理），貨號(hào)為：XPB91D3A2.5/ XPB91D3A25（之前XPB70D3A2.5/ XPB70D3A25已停產(chǎn)），要比未做過(guò)內(nèi)毒素處理的XPB82D3A2.5/ XPB82D3A25內(nèi)毒素含量相對(duì)低很多（并不是不含內(nèi)毒素）。

低內(nèi)毒素的一般用于做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，但由于凍干過(guò)程中無(wú)法保證無(wú)菌，如果做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)做過(guò)濾除菌（0.22 um ）。

注意：

1）塵螨是提取物，提取物是混合物，不是純蛋白。由于工藝和每批過(guò)敏原原料差異，因此每個(gè)批次含量（參數(shù)）都不同。如果對(duì)含量有要求，特別是之前用過(guò)別的批次的，沒(méi)法保證和之前批次一致，請(qǐng)核對(duì)收到貨的COA，確認(rèn)符合您的要求再開(kāi)瓶。

2）過(guò)敏原提取物是混合物，不能作為標(biāo)準(zhǔn)品，如ELISA實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)準(zhǔn)品。

3）參考文獻(xiàn)中用過(guò)Greer 產(chǎn)品的，都沒(méi)有指出具體的是參照哪個(gè)參數(shù)？而且不同文獻(xiàn)用量差別也很大，因此沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)的方案推薦?？蛻粜枰鶕?jù)自己的實(shí)驗(yàn)摸索最佳的實(shí)驗(yàn)條件。

如果以純過(guò)敏原（Der P1）的含量為基準(zhǔn)，成本太高。

如果以：干重（Dry Weight）的含量為基準(zhǔn)，實(shí)際其中的過(guò)敏原的比例太低，不足以致敏。

根據(jù)客戶實(shí)際使用經(jīng)驗(yàn)，客戶驗(yàn)證過(guò)參照Protein 含量做是可以的，因此我們一般推薦客戶以“蛋白含量 Protein"為基準(zhǔn)，具體實(shí)驗(yàn)條件客戶需要自己摸索。

關(guān)于稀釋、保存:

1) 過(guò)敏原提取物均為干粉包裝，不是液體包裝。規(guī)格里的2.5ml 或25ml 指的是瓶裝規(guī)格。

客戶可以根據(jù)實(shí)際工作濃度，用蒸餾水稀釋到儲(chǔ)液濃度，比如：蛋白含量是：4.43mg，用：2.5ml 蒸餾水稀釋后，濃度就是：4.43mg/2.5ml=1.772mg/ml。

2) 塵螨干粉效期是10年，干粉室溫或4℃保存。稀釋后分裝-20℃凍存（保證濃度在：0.1mg/ml以上），效期1年。

注意事項(xiàng)：

1.  蛋白含量不是重量， 不要用天平去稱量，這個(gè)蛋白含量的測(cè)定COA里有說(shuō)明，是Bradford法測(cè)定的，請(qǐng)不要用天平去稱量。如果用天平去稱量了，會(huì)導(dǎo)致無(wú)法定量，請(qǐng)不要做此操作。例如：您要用50ug 的量，那您可以根據(jù)您稀釋后的濃度（比如：1.772mg/ml），可以根據(jù)這個(gè)算出您取多少體積的量就可以了。這樣是可以準(zhǔn)確定量的。

2.  玻璃瓶易碎，請(qǐng)不要置于-80℃保存。

D.pteronyssinus 屋塵螨過(guò)敏原

產(chǎn)品引用文獻(xiàn)：

1. D Canbaz.Immunotoxicity of organophosphate flame retardants TPHP and TDCIPP on murine dendritic cells in vitro

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3.DD Le.Allergic airway inflammation induces the migration of dendritic cells into airway sensory ganglia

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5.John S. House.Genetic variation in HTR4 and lung function: GWAS follow-up in mouse.

6.KK Penberthy.Ex vivo modulation of the Foxo1 phosphorylation state does not lead to dysfunction of T regulatory cells.

7.W Huang.Beyond type 1 regulatory T cells: co-expression of LAG3 and CD49b in IL-10-producing T cell lineages.

8.Matthew T.Mechanism for initiation of food allergy: Dependence on skin barrier mutations and environmental allergen costimulation

9.LO Cruz.Excessive miR-27 expression impairs regulatory T cell-mediated immunological tolerance.

10.T. H. Acciani.Epidermal growth factor receptor signalling regulates granulocyte–macrophage colony‐stimulating factor production by airway epithelial cells and established allergic airway disease.

11.MY Tjota.Signaling through FcRγ-associated receptors on dendritic cells drives IL-33–dependent TH2-type responses.

12.TH Acciani.Diesel exhaust particle exposure increases severity of allergic asthma in young mice.

13.Zhimei Yang.Roles of Bronchopulmonary C-fibers in airway Hyperresponsiveness and airway remodeling induced by house dust mite.

14.MY Tjota.Activation of antigen presenting cells through FcRγ drivesIL-33 dependent Th2-type responses in the lungs.

15.SS Folmsbee.The cardiomyocyte protein αT-catenin contributes to asthma through regulating pulmonary vein inflammation.